1 主题内容与适用范围

本标准规定了种子生活力的生化(四唑)测定、种子健康测定、种子重量测定和包衣种子质量检验方法。

本标准适用于农作物种子质量的检测。

2 引用标准

GB/T 3543.2 农作物种子检验规程扦样

GB/T 3543.3 农作物种子检验规程净度分析

GB/T 3543.4 农作物种子检验规程发芽试验

3 术语

3.1 种子生活力 seed viability

种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。

3.2 种子健康状况 seed health

种子是否携带病原菌(如真菌、细菌及病毒)、有害动物(如线虫及害虫)。

3.3 培养 incubation

将种子保持在有利于病原体发育或病症发展的环境下进行培养。

3.4 千粒重 the weight of 1000 seeds

国家种子质量标准规定水分的1000粒种子的重量，以克为单位。

3.5 丸化种子 seed pellets

为精量播种，整批种子通常做成在大小和形状上没有明显差异的单粒球状种子单位。丸化种子添加的丸粒物质可能含有杀虫剂、染料或其他添加剂。

3.6 包膜种子 encrusted seed

种子形状类似于原来的种子单位，其大小和重量变化范围可大可小。包衣物质可能含有杀虫剂、杀菌剂、染料或其他添加剂。

3.7 种子毯 seed mats

种子随机成条状，簇状或散布在整片用宽而薄的毯状材料(如纸或其他低级材料制成)上。

3.8 种子带 seed tapes

种子随机成簇状或单行排列在狭带的材料(如纸或其他低级材料制成)上。

3.9 处理种子 treated seed

种子用杀虫剂、染料或其他添加剂处理，不引起其大小和形状的显著变化或增加原来的重量。处理种子仍可按GB/T 3543.1-3543.6 的规定方法进行测定。

第一篇 生活力的生化(四唑)测定

4 试剂

应用四唑的0.1%-1.0%(m/V)溶液，1.0%溶液用于不切开胚的种子染色，而0.1%-0.5%溶液可用于已经切开胚的种子染色。配成的溶液须贮存在黑暗处或棕色瓶里。

如果用蒸馏水配制溶液的pH值不在6.5-7.5范围内，则采用磷酸缓冲液来配制。

磷酸缓冲液的配制方法如下：

溶液I：称取9.078g磷酸二氢钾(KH₂PO₄)溶解于1000mL蒸馏水中。

溶液II：称取9.472g磷酸氢二钠(NaH₂PO₄)或11.876g磷酸氢二钠(Na H₂PO₄?2H₂O)溶解于1000mL的蒸馏水中。

取溶液Ⅰ2份和溶液Ⅱ3份混合即成缓冲液。

在该缓冲液中溶解准确数量的四唑盐类，以获得准确的浓度。如每100mL缓冲液中溶入1g四唑盐类即得1%浓度的溶液。

5 仪器、设备

5.1 控温设备

a.电热恒温箱或发芽箱；

b.冰箱。

5.2 观察器具

a.体视显微镜或手持放大镜；

b.光线充足柔和的灯光。

5.3 容器

a.棕色定量加液器；

b.不同规格的染色盘。

5.4 切刺工具

单面刀片、矛状解剖针、小针等。

5.5 预湿物品

滤纸、吸水纸和毛巾等。

5.6 天平

天平感量为0.001g。

5.7 其他

镊子、吸管等。

6 测定程序

6.1 试验样品的数取

每次至少测定200粒种子，从经净度分析后并充分混合的净种子中，随机数取每重量100粒或少于100粒的若于副重复。如是测定发芽末期休眠种子的生活力，则单用试验末期的休眠种子。

6.2 种子的预措预湿

预措是指有些种子在预湿前须先除去种子的外部附属物(包括剥去果壳)和在种子非 要害部位弄破种皮，如水稻种子脱去内外稃，刺破硬实等。

为加快充分吸湿、软化种皮，便于样品准备，以提高染色的均匀度，通常种子在染色前要进行预湿。根据种的不同，预湿的方法有所不同。一种是缓慢润湿，即将种子放在纸上或纸间吸湿，它适用于直接浸在水中容易破裂种子(如豆科大粒种子)，以及许多陈种子和过分干燥种子；另一种是水中浸渍，即将种子完全浸在水中，让其达到充分吸胀，它适用于直接浸入水中而不会造成组织破裂损伤的种子。不同种类种子的具体预湿温度和时间可参见表1。

表1 农作物种子四唑染色技术规定

6.3 染色前的准备

为了使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来，便于四唑溶液快速而充分地渗入和观察鉴定，经软化的种子应进行样品准备。准备方法因种子构造和胚的位置不同而异(详见表1)，如禾谷类种子沿胚纵切，伞形科种子近胚纵切，葱属沿种子扁平面纵切等。西瓜等种子预湿后表面有粘液，可采用种子表面干燥或把种子夹在布或纸间揩擦清除掉。

6.4 染色

将已准备好的种子样品放入染色盘中，加入适宜浓度的四唑溶液(表1)以完全淹没种子，移置一定温度的黑暗控温设备内或弱光下进行染色反应。所用染色时间因四唑溶液度、温度、种子种类、样品准备方法等因素的不同而有差异。一般来说，四唑溶液浓度高，染色快；温度高，染色时间短，但最高不超过45℃。到达规定时间或染色已很明显时，倒去四唑溶液，用清水冲洗。

6.5 鉴定前处理

为便于观察鉴定和计数，将已染色的种子样品，加以适当处理使胚主要构造和活的营养组织明显暴露出来，如一些豆类沿胚中轴纵切，瓜类剥去种皮和内膜等。不同种类种子的处理方法详见表1。

6.6 观察鉴定

大中粒种子可直接用肉眼或手持放大镜进行观察鉴定，对小粒种子最好用10-100倍体视显微镜进行观察。

观察鉴定时，确定种子是否具有生活力，必须根据胚的主要构造和有关活营养组织的染色情况进行正确的判断。一般的鉴定原则是：凡胚的主要构造或有关活营养组织(如葱属、伞形科和茄科等种子的胚乳)全部染成有光泽的鲜红色或染色最大面积大于表1规定，且组织状态正常的为正常有生活力的种子；否则为无生活力的种子。根据种类的不同，具体鉴定标准详见表1。

依据鉴定标准，将各部分分开和计数。

7 结果表示与报告

计算各个重复中有生活力的种子数，重复间最大容许差距不得超过表2的规定，平均百分率计算到最近似的整数。

表2 生活力测定重复间的最大容许差距

在GB/T 3543.1的结果报告单“其他测定项目”栏中要填报“四唑测定有生活力的种子—%”。

对豆类、棉籽和蕹菜等需增填“试验中发现的硬实百分率”，硬实百分率应包括在所填报有生活力种子的百分率中。

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